在生物制药的广阔版图中，酵母表达系统凭借其独特的真核表达优势，已成为仅次于大肠杆菌的重要微生物表达宿主。毕赤酵母、酿酒酵母及汉逊酵母等成熟的表达系统，因具备清晰的遗传背景、稳定的基因整合机制以及高度成熟的操作工艺，在众多重组生物制品的商业化生产中占据核心地位。
从病毒样颗粒（VLP）疫苗、重组GLP-1类似物、重组胰岛素及其类似物，到干扰素、尿酸酶及纤溶酶片段等，酵母表达系统的应用广泛且深入。默沙东的九价HPV疫苗、诺和诺德的司美格鲁肽以及门冬胰岛素、德谷胰岛素等重磅药物，均是该技术平台成功应用的典范。
此外，随着生物技术的飞速发展，更多基于酵母表达的重组多肽、细胞因子、生长因子、治疗性酶、纳米抗体及融合蛋白等创新药物正处于临床开发的快车道。
图1 ：基于酵母菌表达的重组生物制品类型
一、菌种建库：生物制品质量控制的基石
对于重组生物制品而言，研发的核心目标是实现活性成分的高效可及性与稳定产业化。面对多批次、连续化生产的严苛要求，生产用菌种的质量合格性与均一性直接决定了最终产品的批次一致性与安全性。
因此，建立科学、规范的菌种库系统，是确保生产用菌种质量可控、降低潜在污染与变异风险的关键举措。国际上，ICH Q5D《用于生物技术产品及生物制品生产的细胞基质的来源和鉴定》提供了权威指导原则，各国药典亦对菌种建库制定了详尽的规范，为生物制品菌种库的制备、检定与维护奠定了法规基础。
在行业标准实践中，三级菌种库系统（Three-tier Cell Bank System）是公认的优选管理方案：
・原始菌种库（PCB）：作为种子库的起源，PCB经过传代、扩增后保存。
・主菌种库（MCB）：由PCB传代、扩增、分装制备而成，是生产用的源头菌种。
・工作菌种库（WCB）：由MCB进一步传代、扩增、分装制备，直接用于重组生物制品的生产。
二、耀海生物全流程解决方案：从优势筛选到GMP级建库
遵循ICH指导原则及国内外药典要求，依托丰富的项目实战经验，耀海生物构建了一套成熟、严谨且高效的酵母菌种建库服务体系。
图2: 酵母菌菌种建库的流程
2.1/
优势菌种筛选与PCB构建：
精准锁定高表达克隆
酵母表达系统的核心特征在于外源基因通常整合至宿主基因组中，而非以游离质粒存在。在电转转化过程中，往往会生成不同拷贝数的工程化酵母菌株，导致菌株间的外源基因拷贝数与蛋白表达量存在显著差异。因此，筛选高拷贝、高表达的优质菌种是项目成功的先决条件。
耀海生物菌种开发团队为此建立了高通量的优势菌筛选平台，通过精密的筛选策略，我们已成功助力多个项目将重组蛋白的表达量提升3倍以上。获得优势菌株后，我们将其进行单克隆分离与培养，形成传代稳定、性状均一的菌液，从而构建出高质量的PCB。经验丰富的技术团队会综合评估PCB的管数量，确保能够充分满足后续的质量放行检测、菌种稳定性研究以及长期生产的储备需求。
2.2/GMP级二级库建立（MCB与WCB）：
严苛环境保障纯度
在PCB检定合格的基础上，取其一支或多支进行传代、扩增与定量分装，即制备出主菌种库（MCB）；随后由MCB扩增分装得到工作菌种库（WCB）。在此阶段，委托方与服务商需共同依据检测需求及产品的市场潜力，科学规划MCB与WCB的库容。
GMP合规环境是二级库建立的核心要素。为彻底规避污染风险，耀海生物打造了独立的GMP级菌种建库车间。所有的建库操作均在C级洁净区背景下的A级层流罩中进行，由专业技术人员严格执行无菌操作规范，确保二级菌种库的纯净度与安全性。
2.3/菌种库检定与放行：全维度质量守门
菌种库的检定是生物制品质量控制（QC）体系中的关键一环，旨在验证生产用菌种的遗传特性与生物学稳定性。针对酵母菌菌种库，耀海生物开展了系统性的检定工作，涵盖但不限于菌种鉴别、目的产物鉴别、纯度检查以及稳定性研究等。各项检测指标严格对标法规要求，确保每一支放行的菌种均符合生产标准。（注：具体检定项目的详细解析将在后续技术文章中深入分享，敬请关注。）
2.4/
菌种库的科学储存与异地备份：
资产安全的双重保险
菌种作为生产活动的核心起始原料，是极为宝贵的生物资产。维持菌种特性的长期稳定，需要匹配适宜的保藏方法与储存环境。耀海生物提供全面的菌种保藏服务，包括甘油管保藏（超低温冰箱或液氮环境）以及真空冻干保藏等多种技术方案。
此外，为了进一步降低自然灾害或设施故障带来的风险，耀海生物可提供菌种库的异地储存服务，通过多地备份策略，全方位保障客户菌种资产的安全无虞。
03
三、总结
耀海生物，专注微生物表达体系CRDMO服务，拥有十余年大肠杆菌和酵母等微生物菌种建库与生产经验。结合公司完善合规的GMP体系优势，我们沉淀了成熟的一站式菌种建库方案，包括优势菌筛选、PCB建库、MCB建库、WCB建库、菌种库检测放行、菌种库保藏。我们已向全球客户成功交付百余个检定合格的菌种库，项目经验丰富。
高效快速的菌种库开发对于产品的上市进程至关重要。如果您有大肠杆菌和酵母等微生物建库需求，耀海生物可为您提供丰富的建库经验、专业的法规指导、以及一站式的CDMO服务组合。我们设计了合理的开发路线，在规避风险的前提下，最大限度地缩短重组生物制品的CMC开发周期。
